nc膜与pvdf膜的区别
NC 膜(硝酸纤维素膜)和 PVDF 膜(聚偏氟乙烯膜)是蛋白质印迹(Western Blot)等实验中常用的固相支持膜,二者在结构、性能、应用场景等方面有显著区别,具体如下:
1. 材质与结构
NC 膜:
由硝酸纤维素制成,属于天然纤维素的衍生物,膜结构疏松,具有多孔性(孔径通常为 0.22μm 或 0.45μm),表面带有微弱的负电荷。
缺点是易脆化,受潮后容易破损,且不能耐受有机溶剂。
PVDF 膜:
由聚偏氟乙烯聚合物制成,属于人工合成的惰性材料,膜结构致密,机械强度高,耐磨损、耐高温,且化学稳定性强,可耐受多种有机溶剂(如甲醇、乙醇等)。
表面本身不带电荷,需经甲醇预处理(活化)后才能增强对蛋白质的吸附能力。
2. 蛋白质结合能力
NC 膜:
依靠疏水作用和静电引力吸附蛋白质,结合能力中等(约 80-100μg/cm²),对小分子蛋白质(<20kDa)的结合能力较弱,易发生渗漏。
优点是结合速度快,无需预处理即可直接使用。
PVDF 膜:
主要通过疏水作用结合蛋白质,结合能力强(约 100-200μg/cm²),对各类分子量的蛋白质(尤其是小分子蛋白)结合更牢固,不易脱落,适合高灵敏度检测。
但需先用甲醇浸泡 1-5 分钟活化膜表面,否则结合效率会下降。
3. 操作注意事项
NC 膜:
需避免直接用手接触(建议戴手套),否则会留下蛋白污染;湿润状态下易破损,操作需轻柔;孵育后若需保存,需完全干燥后密封避光存放。
PVDF 膜:
使用前必须用甲醇活化(约 30 秒),否则蛋白质无法有效结合;活化后需用去离子水或缓冲液冲洗,去除残留甲醇;因机械强度高,操作时可稍用力,不易破损。
4. 典型应用场景
优先选 NC 膜:
常规 Western Blot 实验、预算有限的场景、对操作便捷性要求高的情况(无需活化)。
优先选 PVDF 膜:
低丰度蛋白检测、小分子蛋白(<20kDa)分析、需要重复杂交(多次检测不同抗体)、实验中需使用有机溶剂(如膜封闭或洗涤步骤含甲醇)的场景。
总结
NC 膜和 PVDF 膜的核心区别在于结合效率、耐溶剂性、机械强度和成本。选择时需根据实验目的(如蛋白丰度、分子量)、操作需求(如是否重复使用)及预算综合判断,二者均能满足大多数蛋白质印迹实验,但 PVDF 膜在性能上更具优势,尤其适合复杂或高要求的实验场景。如果您想了解更多可以关注我们:杭州博瑞新材料技术有限公司成立于2022年,创始人具有20多的年IVD资深行业研发经验。博瑞公司主要生产快诊试纸上使用的硝酸纤维素膜(NC膜),产品经过数年的改进和优化,已达到国内一流NC膜制造水平。
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